È meno probabile che Ag-RDT sia accettato come metodo di test iniziale per la diagnosi precoce a causa della sua bassa sensibilità. Tuttavia, il nostro metodo di auto-raccolta,  Ag-RDT che utilizza campioni di saliva di BG, ha mostrato una sensibilità e una specificità di rilevamento significativamente aumentate per SARS-CoV-2, comprese le varianti alfa e delta in tutti i pazienti testati entro 6 giorni dalla malattia. Il metodo è un’alternativa interessante ai tamponi nasofaringei nella diagnosi precoce dei casi sintomatici e asintomatici di COVID-19. Le prove suggeriscono che il metodo ha il potenziale per lo screening di massa e il monitoraggio dei casi di COVID-19.

Per ottenere un risultato positivo con questi test point-of-care, era necessaria una carica virale 10 volte (LoD50) o 101 volte (LoD95) per i campioni di omcron rispetto ai campioni delta.

Il tasso di veri positivi per i campioni di omicron nella categoria di carica virale più alta (valori di Ct <25) variava tra il 31,4 e il 77,8%, mentre è sceso allo 0-8,3% per i campioni con valori di Ct intermedi (25-trenta). È interessante notare che il test di stock virali estesi ha suggerito una sensibilità comparabile di entrambi i VoC al RAT, mettendo in dubbio il valore predittivo di questo tipo di studio in vitro per le prestazioni cliniche. Data la loro importanza per le strategie di test nazionali nell’attuale ondata di omicron, dovrebbe essere aumentata la consapevolezza del ridotto tasso di rilevamento delle infezioni da omicron da parte dei RAT e dovrebbe essere divulgato tempestivamente un elenco ristretto di RAT idonei che soddisfano i requisiti minimi di prestazione.

• Il test diagnostico rapido basato sull’antigene (Ag-RDT) che utilizza campioni di saliva è veloce, non invasivo e adatto per l’autotest di SARS-CoV-2, a differenza del test con tampone nasofaringeo (NPS).
• Abbiamo valutato un nuovo metodo di raccolta del virus di lavaggio Beanguard (BG) che può essere applicato ad Ag-RDT come alternativa all’attuale NPS RT-PCR per la diagnosi precoce di COVID-19. Questo studio clinico ha incluso 102 pazienti infetti da COVID-19 ricoverati in ospedale dopo lo screening governativo e 100 soggetti sani.
• Coppie di campioni di saliva NPS e BG da pazienti COVID-19 e individui sani sono state analizzate utilizzando NPS-RT-PCR, BG-RT-PCR e BG-Ag-RDT, le cui prestazioni diagnostiche nel rilevamento di SARS-CoV-2  sono state confrontate. I test BG-Ag-RDT hanno mostrato un’elevata sensibilità (97,8%) e specificità (100%) in 45 pazienti entro 6 giorni dalla malattia e hanno rilevato tutti i casi di varianti alfa e delta SARS-CoV-2.
• In 11 casi di COVID-19 attivi asintomatici, sia BG-Ag-RDT che BG-RT-PCR hanno mostrato una sensibilità e specificità del 100%. La sensibilità di BG-Ag-RDT e BG-RT-PCR al rilevamento del virus nella saliva era molto coerente, senza distinguere tra casi sintomatici (97,0%), asintomatici (100%) o SARS-CoV-2 (100%).
• Per le proprietà fisico-chimiche sono state osservate interazioni intermolecolari tra le proteine ​​di picco SARS-CoV-2 e la canavalina troncata, l’ingrediente attivo dell’estratto di fagiolo (BE). La disconnessione del dominio di legame del recettore SARS-CoV-2 da hACE2 è aumentata con l’aumento della concentrazione di BE, consentendo il rilascio del virus da hACE2 per la diagnosi precoce.
• L’uso di campioni di saliva a base di BG migliora significativamente le prestazioni diagnostiche di Ag-RDT come alternativa all’NPS e consente l’autotest COVID-19 non invasivo, rapido e accurato e lo screening di massa, supportando un’efficace gestione del COVID-19.

Rilevamento alterato dell’omicron con i test rapidi dell’antigene SARS-CoV-2.

1. Dall’autunno 2020, il test rapido dell’antigene (RAT) è stato implementato in diversi paesi come un importante pilastro di una strategia di test nazionale per lo screening rapido dell’infezione in loco durante la pandemia SARS-CoV-2. L’attuale aumento del numero di infezioni nel mondo è determinato dalla variante omcron (VoC) (B.1.1.529). Qui abbiamo valutato gli effetti dei nove RAT di SARS-CoV-2 in uno studio di laboratorio a centro unico.
2. Abbiamo testato un totale di 115 campioni di tampone respiratorio SARS-CoV-2 negativi per PCR e 166 campioni di tampone respiratorio SARS-CoV-2 positivi per PCR (101 omicron, 65 delta (B.1.617.2)) raccolti da ottobre 2021 a gennaio 2022 come la coltura cellulare ha ampliato gli isolati clinici di entrambi i COV. Nella valutazione della sensibilità analitica in un campione clinico del 50%, il limite di rilevabilità (LoD50) variava da 1,77 ×  ^106  a   7,03 × 107 copie di RNA sottoposto a RAT per l’omicron rispetto a 1,32 × 105  ^a   2,05 ×  ¹⁰⁶   per il delta.

La pandemia SARS-CoV-2, iniziata a dicembre 2019, rappresenta una seria sfida per il sistema sanitario mondiale.

Poiché la pandemia si sta diffondendo con un numero di casi positivi in ​​rapido aumento, la diagnosi precoce dei pazienti infetti è fondamentale per contenere efficacemente la diffusione del virus. Sebbene la reazione a catena della polimerasi della trascrizione inversa in tempo reale (RT-qPCR) sia il metodo di laboratorio raccomandato per la diagnosi dell’infezione da COVID-19, molti fattori, come la disponibilità di apparecchiature di laboratorio, reagenti e personale addestrato, influenzano l’uso di tecniche molecolari dispendiose in termini di tempo.

Per facilitare la diagnosi in loco di COVID-19, diversi produttori hanno sviluppato test antigenici rapidi SARS-CoV-2. La valutazione di tali test rapidi è particolarmente importante a causa del recente accordo unanime  degli Stati membri della Commissione europea su una Raccomandazione che stabilisce un quadro per l’uso dei test antigenici rapidiche elenca i test reciprocamente riconosciuti e la base di protocolli di convalida indipendenti. 

Valutazione delle prestazioni sul campo di dieci test rapidi SARS-CoV-2 disponibili in commercio (CLINITEST Rapid COVID-19 Antigen Test, GenBody COVID-19 Antigen Test, GENEDIA W COVID-19 Ag Test, Healgen Coronavirus Antigen Test, Humasis COVID-19 Ag Test , VivaDiag SARS-CoV-2 Ag Rapid Test, Helix i-SARS-CoV-2 Ag Rapid Test, Roche SARS-CoV-2 Rapid Antigen Test, Abbot COVID-19 Ag Rapid Test e Vazyme SARS-CoV – 2 kit di rilevamento dell’antigene ) e confrontare con RT-qPCR come metodo di riferimento, il Centro nazionale ungherese per la salute pubblica ha fornito al servizio nazionale di ambulanza 1.597 test antigenici rapidi, camion per test COVID e due ospedali che curano pazienti affetti da COVID-19.

Sensibilità, specificità e accuratezza sono state determinate eseguendo un test rapido direttamente da tamponi nasofaringei di soggetti sintomatici. Per i campioni fortemente positivi (Ct <25), la sensibilità variava dal 66,7% al 100%, mentre per i campioni positivi (Ct <30) davano una sensibilità massima dell’87,5%. La specificità dei test variava dal 79% al 100%.