Abbiamo usato la glicoproteina trimeric spike (S) ricombinante nella conformazione della prefusione per immunizzare i cavalli per la produzione di globuline iperimmune contro SARS-CoV-2. I titoli anticorpali sierici misurati mediante ELISA erano superiori a 1:10 6 e il titolo anticorpale neutralizzante contro il virus autentico (WT) era 1: 14.604 (PRNT medio 90 ).
Il plasma di animali immunizzati è stato digerito con pepsina per rimuovere la porzione Fc e purificato, ottenendo una preparazione F (ab ‘) 2 con titoli PRNT 90 150 volte superiori ai titoli neutralizzanti . nel plasma umano convalescenti. Sono stati condotti studi di sfida nei criceti e hanno mostrato la capacità in vivo dell’equino F (ab ‘) 2 di ridurre la carica virale nei tessuti polmonari e un significativo miglioramento clinico determinato dal peso guadagno. La curva di neutralizzazione di F (ab ‘) 2 era simile rispetto alle varianti WT e P.2, ma spostata a concentrazioni più elevate di 0,39 unità log rispetto alla variante P.1 (Gamma). Questi risultati supportano la possibilità di utilizzare la preparazione equina F (ab ‘) 2 per il trattamento clinico dei pazienti COVID.
Preparazione dell’anticorpo policlonale della proteina ribosomiale S14 nell’arteria polmonare dei broiler: la sua applicazione nella sindrome dell’ascite dei broiler
Il gene RPS14 (proteina ribosomiale S14) mantiene le normali attività fisiologiche dell’organismo regolando la biosintesi dei ribosomi e la traduzione di importanti proteine. Questo studio mira a esplorare il ruolo potenziale di RPS14 nella sindrome dell’ascite dei polli da carne (BAS). Abbiamo preparato con successo l’anticorpo policlonale contro RPS14 e studiato la localizzazione e l’espressione della proteina RPS14 in una varietà di tessuti chiave animali.
In questo esperimento, il plasmide di espressione ricombinante PET28a-RPS14 è stato costruito utilizzando la tecnologia di espressione procariotica di geni estranei. Nelle condizioni di induzione IPTG, è stata espressa una proteina His-RPS14 con un peso molecolare di circa 22 kDa e la proteina ricombinante purificata è stata utilizzata come antigene per preparare il siero antipollo di coniglio.
I risultati del Western blot hanno mostrato che il siero potrebbe identificare specificamente la proteina RPS14 in importanti tessuti dei polli da carne. L’immunofluorescenza combinata con l’analisi dell’omologia ha mostrato che l’antisiero aveva una specificità di specie significativa. Rispetto ad altre specie, l’espressione di questa proteina nei tessuti chiave di polli da carne e anatre era più significativa.
Ancora più importante, il western blotting e l’immunofluorescenza hanno mostrato che BAS ha ridotto significativamente il livello di espressione di RPS14. Ciò ha ulteriormente indicato che la proteina RPS14 può essere utilizzata come uno degli importanti punti di ingresso per la ricerca BAS.
Preparazione e identificazione dell’anticorpo policlonale anti-Helicoverpa armigera sulfatase (HaSulf1) di topo
Obiettivo Ottenere l’espressione procariotica della proteina Helicoverpa armigera sulfatase 1 (HaSulf1) e preparare i suoi anticorpi policlonali. Metodi È stato inizialmente costruito un vettore di espressione procariotico. Dopo aver indotto l’espressione della proteina, la proteina ricombinante grezza è stata raccolta e purificata con una colonna di nichel, che è stata iniettata in topi immunizzati.
Il sangue di topo è stato raccolto per rilevare i titoli degli anticorpi policlonali mediante ELISA e la specificità immunitaria è stata rilevata mediante Western blotting. Risultati È stato ottenuto il plasmide ricombinante e la proteina di fusione è stata espressa e purificata positivamente. I dati ELISA hanno mostrato che il titolo dell’anticorpo policlonale era 1: 819 200. Il western blotting ha mostrato che gli anticorpi preparati potrebbero legarsi sia alla proteina ricombinante espressa in vitro che alla solfatasi naturale dei vermi del cotone. Conclusione È stata ottenuta l’espressione procariotica della proteina HaSulf1 ricombinante e sono stati preparati anticorpi policlonali di topo specifici.
Produzione e caratterizzazione di anticorpi policlonali e monoclonali della proteina poriforme della lampreda
Nella lampreda vertebrata senza mandibola più primitiva, la citotossicità complemento-dipendente regolata dai recettori linfocitari variabili (VLR) gioca un ruolo importante nell’immunità adattativa. I nostri studi precedenti hanno dimostrato che la proteina che forma i pori della lampreda (LPFP) ha agito come effettore terminale del VLR per lisare e uccidere le cellule bersaglio.
Qui, la proteina GST-LPFP ricombinante è stata espressa e purificata nel sistema di espressione procariotica e quindi utilizzata come immunogeno per produrre l’anticorpo monoclonale di topo e l’anticorpo policlonale di coniglio. Con questi anticorpi, abbiamo dimostrato che LPFP esisteva come omodimero nel siero di lampreda e poteva essere reclutato nella membrana delle cellule bersaglio dopo la stimolazione. In conclusione, gli anticorpi che abbiamo prodotto potrebbero riconoscere specificamente la proteina LPFP, che potrebbero essere gli strumenti utili per studiare ulteriormente il meccanismo di formazione dei pori di LPFP.
Test di generazione ed effetto di un anticorpo terapeutico policlonale mirato alla SARS-CoV-2 RBD basato su un sistema di screening degli organoidi delle vie aeree 2-D
La malattia da coronavirus 2019 (COVID-19) è una malattia infettiva respiratoria acuta causata dall’infezione con la sindrome respiratoria acuta grave coronavirus 2 (SARS-CoV-2). La FDA degli Stati Uniti ha approvato diverse terapie e vaccini in tutto il mondo attraverso l’autorizzazione all’uso di emergenza in risposta alla rapida diffusione di COVID-19. Tuttavia, l’efficacia di questi trattamenti è messa in discussione dalle mutazioni di fuga virale. È urgente sviluppare trattamenti efficaci per la protezione dall’infezione da SARS-CoV-2 e stabilire un modello stabile di screening degli effetti per testare potenziali farmaci.
Gli anticorpi policlonali (pAbs) hanno un vantaggio intrinseco in tali sviluppi perché possono mirare a ceppi virali rapidamente mutanti a causa della complessità dei loro epitopi di legame. In questo studio, abbiamo generato pAbs del dominio anti-recettore-binding (anti-RBD) dal siero di coniglio e ne abbiamo testato la sicurezza e l’efficacia in risposta all’infezione da SARS-CoV-2 sia in vivo che ex vivo .
Gli organoidi bidimensionali (2-D) dell’epitelio bronchiale umano primario sono stati coltivati e differenziati in una morfologia matura e successivamente impiegati per l’infezione da SARS-CoV-2 e lo screening dei farmaci. I pAb proteggono gli organoidi delle vie aeree da infezioni virali e danni ai tessuti. I potenziali effetti collaterali sono stati testati in modelli murini sia per inalazione che per iniezione venosa. I pAb hanno mostrato effetti di neutralizzazione virale efficaci senza effetti collaterali significativi.
Pertanto, l’uso di pAb derivati dal siero immunitario animale potrebbe essere una potenziale terapia per la protezione contro l’infezione da SARS-CoV-2, con la strategia sviluppata per produrre questi pAb che forniscono nuove informazioni sul trattamento delle infezioni del tratto respiratorio, in particolare per le infezioni da virus . in rapida mutazione.
1-step Polymer HISTO-STAT; HRP anti Rat Adsorbed (Secondary Reagent Component) for staining Mouse antibodies-on-Rat tissue, 250 slides plus |
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NB312RMA-15 |
Innovex |
15 ml |
651.6 EUR |
STAT-Q anti Mouse, Rat Adsorbed Secondary Linking antibody (Secondary Reagent component) for staining Mouse antibodies-on-Rat tissues, 250 plus slides |
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NB318MR-20 |
Innovex |
15 ml |
553.2 EUR |
STAT-Q anti-Rat, Mouse Adsorbed Secondary Linking antibody (Secondary Reagent component) for staining Rat antibodies-on-Mouse tissue, 250 plus slidesl |
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NB619RK-20 |
Innovex |
15 ml |
553.2 EUR |
1-step Polymer HISTO-STAT Peroxidase (HRP) Multivalent-AEC KIT for IHC staining of Mouse, Rabbit & Rat primary antibodies, 900 plus slides (Large size kit) |
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NB312LC |
Innovex |
900 slides |
1249.2 EUR |
1-step Polymer HISTO-STAT Peroxidase (HRP) Multivalent-AEC KIT for IHC staining of Mouse, Rabbit & Rat primary antibodies, 350 plus slides (Small size kit) |
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NB312LC-20 |
Innovex |
350 slides |
930 EUR |
1-step Polymer HISTO-STAT Peroxidase (HRP) Multivalent-DAB KIT for IHC staining of Mouse, Rabbit & Rat primary antibodies, 900 plus slides (Large size kit) |
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NB312LD |
Innovex |
900 slides |
1249.2 EUR |
1-step Polymer HISTO-STAT Peroxidase (HRP) Multivalent-DAB KIT for IHC staining of Mouse, Rabbit & Rat primary antibodies, 350 plus slides (Small size kit) |
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NB312LD-20 |
Innovex |
350 slides |
930 EUR |
1-step Polymer HISTO STAT Alkaline Phosphatase Fast Red-KIT for IHC staining of Mouse & Rabbit & Rat primary antibodies, 900 slides plus (Large size kit) |
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NB317LF |
Innovex |
900 slides |
1249.2 EUR |
1-step Polymer HISTO STAT Alkaline Phosphatase Fast Red-KIT for IHC staining of Mouse & Rabbit & Rat primary antibodies, 350 plus slides (Small size kit) |
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NB317LF-20 |
Innovex |
350 slides |
888 EUR |
