• Densità parassitarie/concentrazioni target antigeniche basse o alte possono influenzare l’accuratezza e la sensibilità degli RDT che rilevano PfHRP2. Abbiamo analizzato l’efficacia di SD Bioline Malaria Ag Pf / Pan RDT contro   la parassitemia da P. falciparum   in Madagascar, dove la malaria clinica da  Plasmodium vivax   si verifica insieme a   P. falciparum  . Novecentosessantatre campioni di pazienti in cerca di assistenza per sospetta infezione da malaria sono stati analizzati mediante RDT, microscopia e un test specifico  per la rilevazione della ligasi del plasmodio   e la microsfera a fluorescenza (LDR-FMA).
• Il risultato positivo dell’infezione da Plasmodium   in questa diagnosi è stato rispettivamente del 47,9%, 46,9% e 58%. Solo le infezioni da Plasmodium falciparum hanno dominato  (microscopia 45,7%; LDR-FMA 52,3%). Un totale del 16,3% di   P. falciparum  , del 70%   di P. vivax  e di tutte  le infezioni da Plasmodium malaria  ,   Plasmodium ovale  e specie miste erano submicroscopiche. In 423  infezioni da P. falciparum   mono confermate al microscopio e al metodo LDR-FMA, la parassitemia nei soggetti positivi sia per la banda PfHRP2 che per quella pan-pLDH era significativamente maggiore rispetto a quelli che erano positivi solo per la banda PfHRP2 (  P   <0,0001). Plasmodium falciparum parassitemia in quelli rilevati come   P.
• falciparum  – solo infezioni microscopiche, ma anche infezioni miste di  P. falciparum   da LDR-FMA hanno mostrato risultati simili con banda RDT positiva. Inoltre, per confermare questa osservazione, abbiamo utilizzato varie parassitemie (3-0,0001%) del ceppo 3D7 mantenuto in laboratorio. Una banda pLDH positiva in individui con  infezione da P. falciparum elevata  può complicare la diagnosi e il trattamento, soprattutto quando la microscopia non consente di identificare   P. vivax  e queste due infezioni richiedono metodi di trattamento diversi.

Valutazione clinica del test rapido STANDARD Q COVID-19 Ag per lo screening della sindrome respiratoria acuta grave 2 del Coronavirus.

I test standard per la sindrome respiratoria acuta da Coronavirus 2 (SARS-CoV-2) rilevano la presenza di RNA virale utilizzando la PCR a trascrizione inversa in tempo reale (rRT). Recentemente sono stati sviluppati metodi convenienti, veloci e relativamente poco costosi per il rilevamento dell’antigene SARS-CoV-2 (Ag). Il test STANDARD Q COVID-19 Ag (SD Biosensor, Inc., Suwon, Korea) è un test immunocromatografico rapido che rileva qualitativamente la proteina nucleocapside SARS-CoV-2 utilizzando anticorpi coniugati con oro. Abbiamo valutato le sue prestazioni rispetto al test Allplex 2019-nCoV (Seegene, Seoul, Corea) in uno studio caso-controllo retrospettivo utilizzando campioni residui.

La sensibilità e la specificità del test STANDARD Q COVID-19 Ag erano rispettivamente dell’89,2% (58/65) e del 96,0% (96/100). Le soglie del ciclo (Ct) per i tre geni bersaglio SARS-CoV-2 (envelope, RNA polimerasi RNA-dipendente e geni nucleocapside) inclusi nel test Allplex 2019-nCoV erano significativamente inferiori nei pazienti Ag-positivi rispetto ai pazienti Ag-positivi negativi (  p  <0,001). La sensibilità del test Ag era maggiore nei campioni con Ct≤30 e prelevati da uno a cinque giorni dopo l’insorgenza dei sintomi. In sintesi, il test STANDARD Q COVID-19 Ag può essere utilizzato in alternativa in condizioni di alta prevalenza, quando viene compensata una bassa sensibilità o quando i test rRT-PCR sono limitati.

Abbiamo valutato l’accuratezza diagnostica di due test antigenici rapidi point-of-care (RAT) di nuova concezione per il rilevamento di SARS-CoV-2, AFIAS COVID-19 Ag e ichromaTM COVID-19 Ag ed abbiamo esaminato la cinetica dell’antigene.

Sono stati analizzati un totale di 200 campioni nasofaringei (NP) estratti in serie da 38 pazienti COVID-19 e 122 campioni di controllo negativo. La sensibilità e la specificità diagnostica sono state valutate rispetto ai risultati dei test molecolari e divise in base ai geni target (E, RdRP e N) e ai giorni dopo l’insorgenza dei sintomi (PSO).

• Per valutare la cinetica in base al numero di giorni PSO sono stati utilizzati i tassi di cut-off dei campioni seriali di NP. Entrambi i RAT hanno mostrato una sensibilità del 91,3-100% per i campioni con una soglia del ciclo (Ct) <25. La specificità di AFIAS era del 98,7–98,9% e ichromaTM era del 100,0%. I valori di AFIAS e ichromaTM kappa per i test molecolari di campioni con Ct <25 (RdRP) erano rispettivamente 0,97 e 1,00.
• La sensibilità di AFIAS e ichromaTM per tutti i geni era inferiore per i campioni prelevati a 8-14 PSO rispetto a quelli raccolti prima del PSO di 7 giorni. I profili cinetici hanno mostrato che i livelli di antigene sono diminuiti gradualmente da ≤7 giorni PSO a> 22 giorni PSO. Entrambi i RAT hanno mostrato un’eccellente specificità e sensibilità accettabile per campioni NP con titoli virali più elevati e campioni prelevati entro 7 giorni dalla PSO.
• Pertanto, possono diventare strumenti utili per la diagnosi precoce di SARS-CoV-2. Tuttavia, a causa delle preoccupazioni per un falso negativo, il RAT dovrebbe essere utilizzato insieme ai test molecolari.
• Il test diagnostico rapido ultrasensibile Histidine-Rich 2 (Alere uRDT) (Alere  Plasmodium falciparum   Malaria Ag) è un nuovo strumento diagnostico più costoso di altri test diagnostici rapidi (RDT) per la malaria utilizzati di routine nelle cliniche ugandesi.
• Il produttore consiglia di testare i campioni entro 2 giorni e di valutare i risultati dopo 20 minuti, il che potrebbe essere poco pratico nelle cliniche ad alto volume e con scarse risorse. Abbiamo confrontato i test con Alere Ag Rapid Diagnostic Test  (uRDT), CareStart RDT, microscopia e reazione a catena della polimerasi quantitativa ultra sensibile con la trascrizione inversa dell’rRNA I8S (qRT-PCR) utilizzando campioni di sondaggi e clinici. Per Alere uRDT, abbiamo utilizzato campioni di sangue di indagine conservati a 4°C per 44 giorni e alcuni campioni clinici sono stati deliberatamente misurati in più di 20 minuti.
• I test Alere uRDT e qRT-PCR hanno identificato casi asintomatici di parassitemia rispettivamente nel 56% e nel 72% dei campioni del sondaggio originariamente giudicati negativi da CareStart RDT. Utilizzando qRT-PCR come gold standard, Alere uRDT ha superato CareStart RDT nella stima della frequenza del parassita asintomatico in uno studio trasversale (  p   = 0,007) e nel rilevare la malaria clinicamente significativa; entrambi gli RDT erano comparabili nel rilevare la parassitemia asintomatica in clinica (  p   = 0,599). Il punteggio Alere uRDT a 20 minuti ha dato risultati validi come confermato da CareStart RDT, ma c’era un background coerente; La valutazione di Alere uRDT di oltre 20 minuti ha dato risultati falsi positivi.
• Alere uRDT ha superato CareStart RDT in una prova sul campo nella stima dell’incidenza della malaria e in clinica per la malaria sintomatica. Ha fornito risultati affidabili utilizzando campioni conservati a 4°C per 44 giorni, ma i risultati dei test letti per più di 20 minuti non erano validi.

In contesti con risorse limitate o orientati all’assistenza, i test diagnostici rapidi (RDT), che mirano a rilevare simultaneamente gli anticorpi dell’HIV e l’antigene del capside p24 (p24CA) con elevata sensibilità, possono essere un’importante alternativa allo screening per le infezioni precoci.

Abbiamo valutato l’attività degli anticorpi e dei componenti antigenici della vecchia e della nuova versione di RDT Determinare HIV-1/2 Ag/Ab Combo RDTs in parallelo con la quantificazione nel dosaggio immunologico antigene/anticorpo di quarta generazione (4G-EIA), dosaggio immunologico dell’antigene p24CA ( p24CA-EIA), immunoblot e quantificazione degli acidi nucleici. Sono stati inclusi campioni di plasma di infezioni acute e non trattate da HIV-1 (stadi Fiebig I-VI, sottotipi A1, B, C, F, CRF02_AG, CRF02_AE, URF) o infezioni croniche da HIV-1 e HIV-2. La componente antigenica del test è stata anche valutata rispetto a un pannello di trasmettitori/fondatori dell’HIV-1 (T/F) sottotipo B, ceppi di HIV-2 e isolati primari di HIV-2.

Inoltre,  abbiamo valutato la sensibilità analitica di RDT nel rilevare p24CA utilizzando lo standard altamente purificato p24CA HIV-1  _NL4-3   . Abbiamo scoperto che il 77% dei campioni di plasma da pazienti HIV-1 infetti acuti, immunoblot-negativi con Fiebig stadi II-III dell’HIV sono stati identificati dal nuovo RDTmentre solo il 25% è risultato positivo nel vecchio RDT. Entrambi gli RDT hanno risposto a tutti i campioni di pazienti con infezione cronica da HIV-1 e con infezione acuta da HIV-1 con risultati positivi di immunoblotting. Tutti i campioni di pazienti affetti da HIV-2 cronicamente infetti sono risultati positivi al nuovo RDT. Vale la pena notare che la sensibilità della RDT nel rilevare il p24CA ricombinante dal sottotipo del virus B variava tra 50 e 200 pg / ml, riflesso anche nella rilevazione dei virus HIV-1 T / F solo a concentrazioni di antigene dieci volte superiori a quanto suggerito da il produttore. RTD non ha riconosciuto nessuno dei virus HIV-2 testati.

I nostri risultati indicano che la nuova versione di Determina ™ HIV-1/2 Ag/Ab Combo mostra una maggiore sensibilità nel rilevare campioni di plasma HIV-1 p24CA positivi e immunoblot negativi rispetto alla versione precursore. La sensibilità di 4G-EIA e p24CA-EIA nel rilevare il principale antigene strutturale dell’HIV, e quindi nella diagnosi delle infezioni acute prima della sieroconversione, è ancora più elevata.

Gli attuali test diagnostici rapidi per la malaria (RDT) contengono anticorpi contro la proteina 2 ricca di istidina specifica del  Plasmodium falciparum (PfHRP2)  , il plasmodio lattato deidrogenasi  (pLDH) e l’aldolasi in varie combinazioni.

Densità parassitarie/concentrazioni target antigeniche basse o alte possono influenzare l’accuratezza e la sensibilità degli RDT che rilevano PfHRP2. Abbiamo analizzato l’efficacia di SD Bioline Malaria Ag Pf / Pan RDT contro   la parassitemia da P. falciparum   in Madagascar, dove la malaria clinica da  Plasmodium vivax   si verifica insieme a   P. falciparum  . Novecentosessantatre campioni di pazienti in cerca di assistenza per sospetta infezione da malaria sono stati analizzati mediante RDT, microscopia e un test specifico  per la rilevazione della ligasi del plasmodio   e la microsfera a fluorescenza (LDR-FMA).

Il risultato positivo dell’infezione da Plasmodium   in questa diagnosi è stato rispettivamente del 47,9%, 46,9% e 58%. Solo le infezioni da Plasmodium falciparum hanno dominato  (microscopia 45,7%; LDR-FMA 52,3%). Un totale del 16,3% di   P. falciparum  , del 70%   di P. vivax  e di tutte  le infezioni da Plasmodium malaria  ,   Plasmodium ovale  e specie miste erano submicroscopiche. In 423  infezioni da P. falciparum   mono confermate al microscopio e al metodo LDR-FMA, la parassitemia nei soggetti positivi sia per la banda PfHRP2 che per quella pan-pLDH era significativamente maggiore rispetto a quelli che erano positivi solo per la banda PfHRP2 (  P   <0,0001). Plasmodium falciparum parassitemia in quelli rilevati come   P.